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Quais são as maneiras de testar a proteína na urina canina?

Quais são as maneiras de testar a proteína na urina canina?


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Eu sei que uma maneira é usar os bastões de reagente e o refratômetro, mas isso é impreciso. A proteína é distinguível ao usar um microscópio? É sensível ao tempo (ou seja, tem que testá-lo imediatamente)?


Depois de alguma pesquisa, pude encontrar basicamente dois testes para testar o conteúdo de proteína na urina de cachorro.

1) O teste da tira reagente de urinálise (referência), que pode dar resultados falsos positivos (referência). Aqui está o link para um teste de laboratório feito com o método da vareta e os resultados que os pesquisadores obtiveram.

Uma amostra de vareta (referência)

2) O segundo teste seria o teste de cloreto de benzetônio (referência).

Este teste precipita a proteína e aumenta a turbidez da amostra. A turbidez é proporcional à concentração de proteína. Esta técnica é muito sensível e pode produzir resultados precisos em amostras com concentrações de proteína muito baixas (<20 mg / dL).

Um estudo de laboratório feito usando este procedimento para precipitar a proteína (referência).

A amostra de urina deve ser lida 30 minutos após a coleta, caso contrário, certos fatores (como cristais, bactérias e células) podem alterar sua composição (dissolver-se ou multiplicar-se) com o tempo. Se você coletar uma amostra de urina em casa, deixe-a na clínica veterinária o mais rápido possível (referência).

Razões para o excesso de proteína, se presente na urina de seu animal de estimação, estão listadas neste artigo.


Quais são as maneiras de testar a proteína na urina canina? - Biologia

Causas pós-glomerulares de perda de proteína renal, como hemorragia e inflamação, também contribuem para a quantificação de proteínas na urina.

Tradicionalmente, a perda de proteína na urina tem sido detectada por meio de um teste qualitativo, como uma fita reagente de urina, ou por meio de um teste semiquantitativo, como a proporção de proteína e creatinina na urina.

Uma proporção de creatinina proteína na urina maior que 0,5-1 é considerada anormal.
No entanto, tanto o método da fita reagente quanto a taxa de creatinina da proteína na urina podem ser imprecisos e podem produzir resultados falsos positivos devido à contaminação da urina com glóbulos vermelhos, glóbulos brancos e proteína bacteriana e, portanto, devem ser medidos na amostra de urina com um sedimento inativo e uma cultura negativa.

A quantificação da proteína na urina de 24 horas é mais precisa, mas é tecnicamente mais difícil de obter, exigindo hospitalização e cateterismo urinário de 24 horas com sistema de coleta fechado.

No entanto, um novo teste alternativo está agora disponível para detectar a proteinúria em cães e está sendo lançado para gatos. O Heska E.R.D. O teste de urina canina HealthScreen é um teste semiquantitativo para microalbuminúria em cães.

As vantagens deste teste são que ele é um teste point-of-care que detecta pequenas quantidades de albumina na urina antes da detecção da proteína por meio de uma proporção de creatinina proteína na urina. A microalbuminúria é definida como a presença de albumina na urina entre as concentrações de 1,0 e 30,0 mg / dl (abaixo da capacidade de detecção de um teste de fita reagente de urina ou da proporção de proteína de creatinina na urina).

Assim, isso fornece um indicador anterior de dano renal e perda de proteína. Este teste utiliza um anticorpo anti-albumina canina e, portanto, é específico para albumina canina na urina.

Uma vantagem secundária é que há pouca reação cruzada entre a albumina da urina e os glóbulos vermelhos. Se hematúria macroscópica estiver presente (ou seja, a urina é obviamente de cor vermelha), então pode ocorrer reatividade cruzada com microalbuminúria, mas isso não ocorre com hematúria microscópica (Procedimentos do 21º Fórum ACVIM, SL Vaden, Microalbuminúria: O que é, e como faço para interpretá-lo?).

A reatividade cruzada da piúria é um pouco mais variável. Em um estudo, 67 por cento dos cães com piúria tinham concentrações de albumina na urina inferiores a 1 mg / dl. [Anais do 21º Fórum ACVIM, SL Vaden, Microalbuminuria: O que é e como posso interpretar? Vaden SL et al. J Vet Intern Med 2002 16: 378 (resumo)].

Em um estudo em grande escala com 3.041 cães pertencentes a funcionários de hospitais veterinários, a prevalência geral de microalbuminúria em cães foi de 24,7 por cento (S. Radecki et al. Proceedings of the 21st ACVIM Forum, abstract # 110).

No mesmo estudo, a prevalência de microalbuminúria foi significativamente maior na população de cães mais velha (4 por cento em um ano e 55 por cento em 15 anos).

Esse achado também se correlaciona com o fato de que a proteinúria ocorre em cães com doenças subjacentes, que são mais comuns em cães geriátricos. Um estudo de acompanhamento foi conduzido para pesquisar doenças subjacentes na população de cães com testes positivos.

Informações de acompanhamento foram fornecidas para 572 cães. Cinquenta e seis por cento dos cães foram posteriormente diagnosticados com processos inflamatórios, infecciosos, metabólicos ou outras doenças (www.heska.com/erdscreen/erd_data572.asp). Esses resultados também são consistentes com aqueles encontrados por Whittemore et al., Em que 56 por cento dos cães clinicamente enfermos com microalbuminúria foram diagnosticados com doenças infecciosas, inflamatórias ou neoplásicas (JC Whittemore et al. Proceedings of the 21st ACVIM Forum, abstract # 234 )

Este é um achado importante porque a proteinúria está frequentemente associada a processos de doença subjacentes e, portanto, o teste ERD pode ser usado como um teste de triagem em pacientes mais velhos como um marcador para esses processos subjacentes.

Whittemore et al. também demonstraram que este teste de ERD foi mais sensível na detecção de proteinúria do que a fita reagente de urina ou a proporção de proteína de creatinina na urina. Em uma população de cães clinicamente doentes, 55 cães com proteinúria foram diagnosticados positivos usando o teste de ERD, mas não foram detectados usando uma fita reagente de urina ou proporção de creatinina de proteína na urina.

As recomendações atuais para a prática clínica são usar o teste ERD como um teste de triagem em cães jovens de raças com predisposição hereditária à glomerulopatia. Uma vez que há um aumento acentuado na prevalência de microalbuminúria em cães com mais de 6 anos de idade, pode ser prudente começar a triagem de cães a partir dessa idade (Anais do 21º Fórum ACVIM, S. Vaden `Microalbuminúria: O que é e como faço para interpretar isso?).

Se for encontrado um teste positivo (e é um achado repetível), testes adicionais podem ser realizados para avaliar as doenças subjacentes. Quantificação adicional pode ser feita, se desejado, usando um ELISA para albumina canina, mas deve ser submetida a um laboratório de referência. A progressão para proteinúria evidente pode ser monitorada de perto.

A proteinúria evidente é atualmente tratada com uma dieta baixa em proteínas e administração de um inibidor da ECA como o Enalapril. A adição de um antitrombótico como a aspirina pode ser usada em casos avançados.

Mais informações são necessárias para determinar em que ponto a intervenção terapêutica seria mais benéfica, embora, teoricamente, a detecção precoce permita uma intervenção precoce quando apropriado.

Fonte: Johanna Frank (2003): Uma atualização sobre o diagnóstico de proteinúria em cães. In: DVM Newsmagazine 1º de outubro de 2003 www.dvmnewsmagazine.com/dvm/

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Protocolos de Urinálise

Protocolo de coleta

Instrumentos

As amostras são analisadas usando varetas de medição de urina Multistix (Siemens Healthcare Diagnostics Inc., Deerfield, IL) e refratometria e microscopia de luz.

Requisitos de amostra

A urina coletada por coleta livre, cateterismo ou cistocentese pode ser submetida. Recomenda-se a técnica de coleta estéril / asséptica, quando possível, para evitar contaminação fecal e ambiental.

Volume de amostra preferido *

* Ocasionalmente, amostras de menor volume podem ser acomodadas. Entre em contato com o laboratório a respeito do envio dessas amostras e dos testes disponíveis.

Tubos Adequados

A urina pode ser submetida em qualquer recipiente estéril, sem aditivos, de plástico ou vidro de volume apropriado, incluindo seringas, tubos Eppendorf e tubos com tampa vermelha.

Manuseio de Amostras

Amostras de etiqueta usando um marcador permanente com um sistema de numeração legível e simplificado. Para exame de vareta, gravidade específica e sedimento, as amostras devem ser refrigeradas o mais rápido possível após a coleta e devem ser analisadas dentro de 24 horas para resultados válidos. Eles não devem ser congelados ou transportados diretamente no gelo. Recomenda-se o transporte com embalagens frias. Os testes de química na urina têm estabilidade prolongada. Entre em contato com o laboratório diretamente se desejar enviar amostras de urina congeladas ou arquivadas para testes de química.

Resultados

Os parâmetros gerados a partir da fita reagente de urina incluem medição semiquantitativa de urobilinogênio **, proteína, pH, sangue ***, cetonas ****, bilirrubina e glicose. Testes confirmatórios para a presença de bilirrubina (Ictotest), cetonas (Acetest, ácido acetoacético) e proteína (teste de precipitação com ácido sulfassalicílico, SSA) podem ser realizados se houver um resultado positivo na vareta. A gravidade específica da urina é medida por refratometria. O exame de sedimentos avalia a presença de glóbulos vermelhos, glóbulos brancos, células epiteliais, cristais, cilindros, esperma, lipídio / gordura e bactérias ou fungos.

Interferências Comuns

Amostras com contaminação sangüínea / hematúria, hemoglobinúria e bilirrubinúria marcadas podem resultar em interferência de cor com os parâmetros da vareta. A suplementação de ácido ascórbico oral pode resultar em glicose urinária falso-negativa. Alvejante, peróxido e outros agentes oxidantes fortes podem resultar em glicose na urina falso positivo. Compostos de amônio quaternários e urina altamente alcalina podem resultar em glicose urinária falso-positiva.

* Ocasionalmente, amostras de volumes menores podem ser acomodadas. Entre em contato com o laboratório a respeito do envio dessas amostras e dos testes disponíveis.

** O urobilinogênio só é relatado em amostras de primatas não humanos, pois não é considerado confiável ou válido na maioria das espécies veterinárias.

*** Os glóbulos vermelhos, mioglobina e hemoglobina intactos podem resultar em uma reação de vareta de medição positiva para o sangue.

**** O ácido acetoacético é a única cetona medida pela fita reagente de urina. Outras cetonas não detectadas (beta-hidroxibutirato, acetona) podem estar presentes na urina de espécies veterinárias.


Protocolos de grande volume

Perfil bioquímico de grande volume: protocolos de coleta para espécimes de grande volume (cães, porcos, camelídeos, cavalos, etc.)

Instrumento

Beckman AU480, Beckman Coulter, Brea, CA

Requisitos de amostra

O sangue deve ser coletado em tubos de topo vermelho liso sem aditivo ou separador de gel. Após a coleta, o sangue deve ser coagulado, centrifugado a 1700 rcf * por 10 minutos, o soro removido e colocado em outro tubo de tampa vermelha ou outro tubo de plástico estéril, sem aditivos. Para evitar erros analíticos, o soro deve ser removido do coágulo dentro de 1 hora após a amostragem. Os volumes necessários estão listados na tabela abaixo.

* RCF = força centrífuga relativa = 0,00001118 x r (raio de rotação em cm) x RPM2

Volume de soro necessário
(Nota: não o volume de sangue total)

** Se o volume da amostra for curto, o laboratório tentará executar o máximo de testes possível.

Tubos Apropriados

Os tubos a seguir são adequados para coleta e análise de sangue usando o Beckman Coulter AU480. Entre em contato com o laboratório se tiver dúvidas sobre o tubo apropriado a ser utilizado para suas amostras.

Nome Volume de amostra Nº de fabricante
Tubos de sangue BD Vacutainer (tubos de vidro, sem aditivo) 3 mL 366397
Tubos de sangue BD Vacutainer (tubos de vidro, sem aditivo) 7 mL 366397
Tubos de sangue BD Vacutainer (tubos de vidro, sem aditivo) 10 mL

Manuseio de Amostras

Tubos de etiqueta usando um marcador permanente com um sistema de numeração simplificado e legível. As amostras devem ser refrigeradas o mais rápido possível após a coleta. Recomenda-se o transporte com embalagens frias, não transporte diretamente no gelo. Entre em contato com o laboratório para obter mais instruções se desejar enviar amostras congeladas e arquivadas para análise.

Resultados

Os resultados estão disponíveis em formato Excel.

Interferências Comuns

Certos graus de lipemia, hemólise e icterícia (LIH) podem interferir na análise de alguns analitos. Os índices LIH e as interferências esperadas são relatados para amostras de perfil básico e completo. Os níveis de potássio podem ser aumentados artificialmente e a glicose diminuída artificialmente em amostras em que o soro permaneceu no coágulo sanguíneo por um longo período de tempo.


Quando a cristalúria é uma preocupação?

A cristalúria é freqüentemente um achado incidental e, em muitos casos, nenhuma investigação ou tratamento adicional é necessário, seu veterinário pode aconselhá-lo se este for o caso de seu cão. No entanto, se seu cão estiver apresentando sinais de infecção do trato urinário & # 8212 tendo dificuldade para urinar, urinar com frequência, urinar em locais incomuns ou se houver sangue na urina & # 8212, é importante que um veterinário examine seu cão e faça um diagnóstico adicional testes. Os sinais podem ser causados ​​por cálculos na bexiga e, quanto mais cedo os cálculos forem diagnosticados, mais opções estarão disponíveis para o tratamento, além de prosseguir direto para a remoção cirúrgica.


Teste de urina: Por que testar a urina do seu gato?

A realização regular de exames veterinários em seu gato é a melhor maneira de mantê-lo saudável. Na maioria dos casos, seu veterinário provavelmente recomendará exames de sangue e urina como parte de um exame completo. Se seu gato não estiver se sentindo bem, exames de sangue e urina podem ser necessários para diagnosticar a doença do gato.

Já falamos sobre exames de sangue comuns e o que podemos aprender com eles em um post anterior. Hoje, gostaria de falar sobre os testes de urina e explicar o que seu veterinário pode estar procurando na urina do seu gato.

Urinálise é, de longe, o teste de urina mais comumente realizado. Um exame de urina (ou UA, como costuma ser chamado) é, na verdade, composto de muitos testes diferentes. Um teste de urinálise típico para o seguinte:

  • Avaliação Visual: Se a urina do seu gato estiver descolorida ou apresentar uma clareza anormal (ou seja, urina turva, por exemplo), esses achados serão anotados aqui. A urina normal deve ser amarela e transparente.
  • Gravidade específica da urina (USG): Esta é uma medida da concentração da urina do seu gato. A urina que passa pelos rins sem alteração na concentração tem uma gravidade específica de 1,008 a 1,012. Essa urina é denominada isostenúrica. Gatos saudáveis ​​devem ser capazes de produzir urina relativamente concentrada, geralmente com USG de 1,050 ou superior. Se a urina estiver muito diluída, medida como uma gravidade específica da urina anormalmente baixa, seu gato pode estar sofrendo de uma doença que afeta sua capacidade de produzir urina concentrada. Isso pode resultar de doenças como diabetes, doenças renais e muitas outras. É importante lembrar que a USG pode mudar drasticamente entre uma amostra de urina e a seguinte. Em alguns casos, várias amostras de urina podem precisar ser testadas para determinar se um gato está produzindo urina consistentemente diluída. Avaliar a USG em conjunto com sinais clínicos, achados de exames físicos e resultados de exames de sangue também é útil e ajudará seu veterinário a determinar a significância do resultado da USG ou outros resultados laboratoriais anormais.
  • PH da urina: O pH é uma medida de acidez, neste caso a acidez da urina do seu gato. Quanto mais baixo o número do pH, mais ácida é a urina. O pH da urina terá impacto sobre os tipos de pedras e / ou cristais que podem se formar na urina do seu gato. Alguns tipos de cálculos se formam na urina com valores de pH mais baixos e outros são mais prováveis ​​de serem encontrados em valores de pH mais altos. Alguns tipos de bactérias também preferem faixas de pH específicas. A manipulação do valor do pH pode ser útil para lidar com alguns problemas do trato urinário.
  • Glicose: Comumente conhecida como “açúcar”, a glicose na urina é mais frequentemente uma indicação de diabetes, embora o estresse possa fazer com que a glicose apareça na urina em alguns casos também.
  • Cetonas: As cetonas são mais freqüentemente encontradas na urina de animais diabéticos. A cetose ocorre quando a glicose não pode ser utilizada para a produção de energia. A gordura corporal é então decomposta em cetonas que podem passar pelos rins para a urina. As cetonas na urina muitas vezes indicam uma situação de crise.
  • Bilirrubina: A bilirrubina, um produto da degradação dos glóbulos vermelhos, é normalmente removida no fígado e torna-se parte da bile. Quando encontrado na urina, pode ser uma indicação de doença hepática ou outras doenças, como distúrbios hemorrágicos.
  • Sangue: O sangue pode ser encontrado na urina por vários motivos. Chamado de hematúria, o sangue na urina pode ser uma indicação de infecção do trato urinário (ITU), cistite, cálculos renais ou na bexiga, doença renal, câncer do trato urinário ou distúrbios hemorrágicos.
  • Proteína: A proteína na urina pode ser causada por doenças renais e também por outras doenças.
  • Sedimento de Urina: O exame do sedimento urinário envolve a separação das células e outras substâncias sólidas da porção líquida da urina por centrifugação. O sedimento é examinado em busca de glóbulos vermelhos, glóbulos brancos, bactérias, cilindros, cristais, mucosas ou outras células. Essencialmente, esta parte do exame de urina examina o componente sólido e celular da urina, procurando por números anormais de células ou outros materiais que normalmente não deveriam estar presentes na urina. Pode fornecer pistas adicionais sobre o estado de saúde do seu gato.

Em alguns casos, seu veterinário também pode realizar testes de urina ainda mais especializados:


Como evitar que seu cão urine poucas horas antes da visita ao veterinário

  • Se eles forem pequenos o suficiente para fazê-lo confortavelmente, leve seu cachorro do carro para o consultório do veterinário.
  • Se eles forem muito pesados ​​para carregar, corra com seu cachorro na coleira do carro para o consultório do veterinário, não dê a eles a chance de cheirar e fazer xixi.
  • Não deixe seu cachorro entrar no quintal sem vigilância antes da visita ao veterinário. Se tiverem que sair, vá com eles, coloque-os na coleira e colete a urina (ver truques e dicas abaixo).
  • A equipe veterinária irá coletar uma amostra fresca durante sua consulta, portanto, manter a bexiga do seu cão cheia é útil.


A revisão:

Recebi o kit PawCheck de infecção do trato urinário que incluía:

  • Uma concha ajustável para coletar a urina
  • Instruções fáceis de ler
  • Tira de teste de pata para infecção do trato urinário
  • Um gráfico de cores para consultar com a tira de teste

A concha ajustável é uma excelente ideia e evitou que qualquer urina nas mãos, o que é uma novidade. A embalagem era ótima e me deu a tranquilidade de estar usando materiais estéreis.

Peguei Leroy e peguei uma amostra de urina usando a concha ajustável.

Eu cuidadosamente derramei a urina em um copo pequeno.

Tirou a tampa do dispositivo de urina PawCheck

Defina a tira de teste na urina por 2 minutos

Como você pode ver pelo stick abaixo, o teste mostra que Leroy tem um traço de leucócitos (glóbulos brancos) na urina, o que significa que iremos ao veterinário ainda esta semana.

Não estou muito preocupado com esse achado porque é uma pequena quantidade, não há sangue e os nitritos são negativos, mas com sua história, pedimos ao veterinário para verificar uma amostra de sua urina ao microscópio apenas para ter certeza.

O que eu acho desse produto?

Você pode dizer muito da urina de um animal de estimação, então eu acho que este é um ótimo produto para donos de animais que desejam ser proativos com a saúde de seus animais de estimação ou para donos de animais de estimação que desejam manter o controle sobre uma condição específica de seus animais de estimação.

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O que ajuda ou atrapalha o nível de pH da urina do seu cão?

Um de nossos clientes recentemente nos contou como o problema de cristal urinário de seu cachorro foi resolvido após a transição de um alimento muito rico em proteínas para CARNA4. Encantada com os resultados, ela queria saber exatamente “qual” o nível de pH da urina CARNA4 produzia.

Para obter respostas, consultamos o Dr. Scott Morton, presidente da Mortec Scientific Inc. (empresa independente de pesquisa e testes laboratoriais especializada em alimentos para animais de estimação, alimentos para o consumidor e produtos naturais para a saúde e supervisiona a qualidade do CARNA4), bem como Maria Ringo, um clássico , homeopata praticante e um de nossos co-fundadores.

A resposta não é um número definitivo, mas fala mais sobre a forma holística de funcionamento do corpo de um cão, semelhante ao dos humanos. Um nível de pH é definido como a concentração de íons de hidrogênio ou, mais simplesmente, a medida da acidez ou alcalinidade no corpo. É influenciado por vários fatores. “É a soma de todos os processos metabólicos do corpo, da digestão à eliminação, que trabalham juntos para determinar o pH, não apenas a entrada de comida do cão”, diz Maria. “Você precisa considerar o pH dos alimentos e bebidas digeridos e absorvidos, conhecido como cinzas.”

“Em termos práticos, isso significa que comer muito carnes, gorduras e açúcares em comparação com alimentos vegetais e grãos inteiros com seus nutrientes neutralizantes alcalinos pode criar um ambiente de pH corporal ácido”, explica ela. “E este ambiente ácido pode causar inflamação e permitir o desenvolvimento de doenças.”

O Dr. Morton vai além para delinear o impacto de vários ingredientes. “Uma dieta contendo altos níveis de ingredientes de baixa qualidade, como sal, proteína, lactose, sacarose, frutose e magnésio, eleva e cria uma concentração desequilibrada de cálcio na urina de um cão. Um baixo nível ou uma fonte pobre de fósforo também aumenta a concentração de cálcio - criando cristais de oxalato e potencialmente pedras nos rins. ”

Ele descreve como desequilíbrios de vitaminas e erros de formulação, que podem ocorrer com pré-misturas sintéticas ou ingredientes abaixo do padrão, também podem causar estragos. “Uma dieta muito baixa ou muito rica em vitamina D pode aumentar o cálcio na urina - levando a cristais ou doenças urinárias com o tempo. Da mesma forma, a deficiência de vitamina B6 pode aumentar os níveis de oxalato no sangue e também formar cristais ”, explica o Dr. Morton. “CARNA4 escapa dessas questões porque é um alimento nutricional balanceado que possui todos os atributos necessários a partir de ingredientes de primeira classe”, acrescenta.

No final, respondemos à pergunta de nosso cliente explicando que não testamos ou garantimos níveis específicos de pH da urina. Porque? Porque consideramos a saúde da bexiga o resultado de uma variedade de fatores dietéticos, incluindo a qualidade adequada e o equilíbrio de certas vitaminas, minerais e outros nutrientes, conforme explicado acima. Sabemos que outros fabricantes costumam adicionar ingredientes (que podem causar efeitos colaterais irritantes) para acidificar a urina do animal de estimação e reduzir a formação de cristais causada por ingredientes de baixa qualidade. CARNA4 não precisa desses acidificantes de urina porque a qualidade de seus ingredientes e o perfil nutricional que eles criam reduzem a probabilidade de ocorrerem formações de cristais.

Resumindo: CARNA4 é um bom equilibrador do pH do sangue de um cão acostumado a comer comida processada típica.

Seu cachorro teve cristais urinários? Você mudou a dieta deles para resolver esse problema? Você já tentou mudar para CARNA4? Conte-nos sua história e o que ajudou seu cão.